同位素內標是指在分析化學中,將待測樣品中的某種同位素與已知濃度的同位素標準品混合,作為內標來進行分析的方法。同位素內標法具有高精度、高準確度、高靈敏度等優點,被廣泛應用于各種分析領域。
同位素內標的原理基于同位素的特性。同位素是指現有想同原子序數(即愿子核史質子的個數相同),但質量數不同的原子核。同位素之間的差異主要體現在質量上,因此同位素可以作為質量標記物質。
同位素內標法技術先要使用改造核酸或蛋自質富集體源,當同位素被放入系統時,它們表現出被能夠被不同同位素結合的特殊現象。該現象就使用的是結合雙向結合的概念采用一種專門的分析技術,用來分析宿主體和同位素結合情況,為生物體研究者提供有益的信息,從而發現生物體,活性,信號轉導和調節的內在機制,以及其與特定環境因素的反應調節。
同位素內標法技術主要有三個步驟:先是在系統內放入含有抗體或抗原成分的同位素探針,然后經過反應和聚集后,得到了具有體內活性的化合物,最后,利用儀器來檢測這種反應的強度或細胞的表型變化,然后把這些參數之間的關系圖表映射出來,為研究者提供更多有效信息。
現有多種穩定同位素標記的內標,包括2H (氘標 D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素內標具有較大的傷害性,一般穩定性同位素可以完成的建議優選穩定性同位素內標物,若被檢測物是穩定同位素內標物對應的未標物,那么,較被檢測物而言,對應的同位素標記物只是將部分氫原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被檢測物與對應的穩定同位素內標物理化性質基本一致,尤其在色譜中,幾乎無法區分。